본 발명은 인간 혈소판 용해물(human platelet lysate; hPL) 함유 배지에서 배양된 중간엽 줄기세포를 무혈청 배지에서 배양하여 얻은 성장인자(growth factor) 및 사이토카인를 함유하는 줄기세포 배양액 제조방법 및 상기 줄기세포 배양액을 이용한 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 hPL 함유 배지에 중간엽 줄기세포를 배양한 중간엽 줄기세포 배양액의 제조 방법을 이용하면, FBS 함유 배지에 중간엽 줄기세포를 배양한 중간엽 줄기세포 배양액보다 사이토카인 및 성장인자 함량이 높고, 인간진피섬유아세포 증식 촉진능, 콜라겐 합성능, 엘라스틴 합성능, 멜라닌 합성 억제능 및 발모 효능이 우수한 중간엽 줄기세포 배양액을 수득할 수 있고, 상기 중간엽 줄기세포 배양액을 이용하여 피부 재생, 주름 개선, 피부 탄력 증진, 피부 미백 및 발모 효과가 있는 화장료를 제작할 수 있어, 화장품 분야 및 의약업계에서 널리 사용할 수 있다.