본 발명은 병원균-특이적 효소가 결합된 변색물질을 이용한 바이오센서 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 바이오센서는 병원균-특이적 효소가 결합된 변색물질을 이용함으로써, 병원균의 검출 및 사멸을 동시수행할 수 있고, 상기 바이오센서를 이용하는 경우, 별도의 분석장비 없이도 색변이를 통한 단순하고 경제적인 방법으로 우수한 병원균 검출 효과를 나타낸다.